10.3969/j.issn.1673-548X.2011.12.010
慢病毒介导的HIF-1αmODD在肿瘤细胞中的高表达
目的 在肿瘤细胞中利用重组慢病毒介导缺氧诱导因子-1α突变体(HIF- 1α mODD)在正常氧压下高表达,以模拟肿瘤缺氧微环境下肿瘤细胞中H1F - 1α的高表达,为研究HIF -1介导的缺氧信号通路及其在肿瘤细胞中的作用提供实验模型.方法 将含HIF- 1α mODD基因片段的慢病毒表达质粒pWPI GW/HIF - 1α mODD,与pVSVG及pSPAX质粒共转染人胚肾293T细胞,包装制备重组慢病毒,重组病毒经过纯化后直接感染GLC、H157和YTMLC等肿瘤细胞,并在正常氧压条件下培养,通过RT - PCR、免疫印迹等方法检测HIF- 1α mODD在细胞中的表达水平.结果 重组慢病毒介导HIF-1α mODD在GLC、H157和YTMLC细胞内获得高表达.结论 成功模拟了肿瘤细胞在缺氧微环境下高表达HIF - 1α的情况,为体外研究HIF -1α在肿瘤血管新生及肿瘤生长中的作用提供途径.
H1F-1α、慢病毒、缺氧微环境
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R73;R33
国家自然科学基金面上项目81171946;中国医学科学院医学生物学研究所人才引进项目IMB2009RC01
2012-03-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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