PKH26荧光示踪剂在神经干细胞移植大鼠创伤性脑损伤中的应用

摘要：

目的 探讨神经干细胞移植创伤性脑损伤(TBI)过程中有效的示踪剂,并进一步观察移植后NSCs的自然存活与分化情况.方法 Feeney法制备大鼠TBI模型;将体外培养的NSCs进行PKH26荧光示踪剂标记,并于损伤后第3天移植入脑损伤灶区,对照组注射等量生理盐水.分别于移植后1天、4天、7天及2周、3周、4周、8周取材,行全脑冷冻切片,观察PKH26标记的NSC的自然存活及分布情况;Nestin、βⅢ-微管蛋白和GFAP免疫细胞化学染色观察移植后NSCs的分化.同时,于取材前采用Corner试验进行神经行为学检测.结果 PKH26标记NSCs的阳性率＞95%.移植后第1天、4天,NSCs主要分别于注射部位周围,细胞胞体较小,分布均匀,大部分仍为Nestin阳性表达细胞.移植后第7天,移植NSCs可迁移至嗅球、额叶及枕叶皮质等区域.针道及周围组织NSCs分化为神经元和神经胶质细胞的比例分别为12.3%±2.1%和37.2%±7.6%.移植后第2周,海马、脑桥、小脑普肯耶细胞层等广泛区域均可见移植细胞.移植后第4～8周,移植细胞存活数量呈减少趋势.移植细胞的PKH26染色未见明显减弱.同一时间段内,与对照组相比,NSCs移植组动物的感觉运动功能均有明显改善.结论 PKH26荧光示踪剂可用于体外培养的NSCs脑内移植示踪观察.移植NSC于损伤灶区,可自然分化为神经元和神经胶质细胞,并可迁移至脑内多处远距离部位,能明显改善TBI动物的感觉运动功能.

关键词：PKH26、神经干细胞、移植、创伤性脑损伤

所属期刊栏目：39

分类号：TQ2;R45

资助基金：国家自然科学基金资助项目30850001;辽宁省教育厅科学技术研究项目2008851,2008779

在线出版日期：2010-09-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：39-41,140