膜联蛋白V的异硫氰酸荧光素标记和应用研究

摘要：

目的 制备一种新型的膜联蛋白V,用异硫氰酸荧光素进行标记,观察它对外露磷脂酰丝氨酸(PS)红细胞的荧光染色情况.方法 带有金属螫合位点的膜联蛋白V通过毕赤酵母的培养和甲醇诱导表达获得,膜联蛋白V粗品通过离子交换和硫酸铵沉淀得到纯化产物.在硼酸盐缓冲液完成膜联蛋白V的异硫氰酸荧光素标记,标记产物经过离子交换进行纯化.红细胞经过戊二醛处理后Ps外露于细胞表面.在荧光显微镜下观察异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白V对外露PS红细胞的结合.结果 毕赤酵母重组表达的新型膜联蛋白V经过离子交换和硫酸铵沉淀后得以纯化和浓缩.经过异硫氰酸荧光素进行标记后观察到它对外露PS红细胞的结合.结论 毕赤酵母系统重组表达的膜联蛋白V具有结合外露PS红细胞的能力,可以应用于细胞凋亡的体外检测.

关键词：膜联蛋白V、异硫氰睃荧光素、毕赤酵母、磷脂酰丝氨酸

所属期刊栏目：37

分类号：R51;R44

资助基金：国家自然科学基金资助30500573,30670741;霍英东肺癌专项基金

在线出版日期：2009-02-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：31-33