人表皮生长因子缓释型滴眼剂对角膜碱烧伤的基因治疗

摘要：

目的观察人表皮生长因子基因对角膜细胞的转染情况,探讨用人表皮生长因子基因对角膜损伤治疗的可行性.方法利用基因重组技术构建了人表皮生长因子全基因序列,将该基因序列插入pcDNA3.1真核表达高效穿梭质粒,用脂质体制成人表皮生长因子基因缓释型滴眼剂,滴眼治疗家兔角膜碱烧伤.在治疗后的不同天数,分别测定了角膜组织中人表皮生长因子mRNA和DNA的表达,用ELISA法测定了人表皮生长因子在兔角膜组织中的含量.结果在基因转染后24h至28天,角膜组织分别用RT-PCR和PCR均可检测出人表皮生长因子mRNA和DNA表达.用ELISA法测定人表皮生长因子蛋白质表达水平.结果表明,在转染后24h,实验组分别与对照组和空白组平行对比,实验组蛋白质表达水平明显升高(P＜0.01),第7天达高峰,为224.286ng/g角膜湿重,随后逐渐降低,持续可表达20天以上;在转染后24h,免疫组织化学染色在全层角膜细胞内亦可见hEGF蛋白质表达,第7天达到高峰,细胞转染率高达98%以上,随后逐渐降低,持续可表达20天以上.结论用pcDNA3.1真核表达高效穿梭质粒作为载体,携带人表皮生长因子基因用脂质体包裹后制成缓释型滴眼液,以滴眼的方式给药转染角膜,可达到极高的转染率,具有良好的应用前景.

关键词：表皮生长因子、角膜、基因治疗、脂质体

所属期刊栏目：34

分类号：TS2;TQ6

资助基金：河南省科技发展计划0141163216

在线出版日期：2006-11-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：7-10