GHSR1a shRNA慢病毒载体的构建及其对体内直肠癌生长和凋亡的影响

摘要：

目的：探讨GHSR1a shRNA慢病毒载体的构建及其对体内直肠癌生长和凋亡的影响。方法构建特异性靶向GHSR1a基因的shRNA慢病毒表达载体和阴性对照序列慢病毒载体；通过慢病毒感染建立稳定表达GHSR1a shRNA的SW480细胞(KD)、阴性对照细胞(NC)及空白对照细胞(BC)，RT-PCR检测GHSR1a mRNA在细胞中的表达；建立裸鼠直肠癌SW480细胞皮下移植瘤模型，实验结束后处死裸鼠并测量各组裸鼠肿瘤重量；免疫组织化学法检测肿瘤组织中Ki-67的阳性表达，TUNEL法检测细胞凋亡。结果在体外实验中，通过荧光表达情况及流式细胞学结果表明成功建立稳定表达GHSR1a shRNA的SW480细胞；SW480细胞感染GHSR1a shRNA后，KD组细胞中GHSR1a mRNA的表达明显高于BC组或NC组(<0.001)；在体内实验中，KD组裸鼠直肠癌皮下移植瘤重量明显低于BC组或NC组(=0.011)；KD组移植瘤细胞凋亡指数明显高于BC组或NC组(<0.001)，同时Ki-67在KD组移植瘤细胞中的阳性表达显著低于BC组或NC组(<0.001)。结论成功建立稳定感染GHSR1a shRNA的直肠癌SW480细胞，沉默GHSR1a后对体内人直肠癌细胞生长有明显抑制作用，并促进细胞凋亡，表明GHSR1a基因有可能成为新的直肠癌治疗作用靶点。

关键词：直肠癌、GHSR1a、shRNA

所属期刊栏目：29

分类号：R73;R37

资助基金：岳阳市2014年第三批科技资助项目；湖南省卫生厅资助项目2014A122。

在线出版日期：2016-06-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：179-181