pcDNA3.1(+)/ChM-Ⅰ表达质粒的构建及鉴定

摘要：

目的:为了研究软骨调节素Ⅰ的生物学作用,构建pcDNA3.1(+)/ChM-Ⅰ表达质粒.方法:用Trizol法提取大鼠软骨组织总RNA,根据ChM-Ⅰ基因序列(序列号:AF051425)设计特异引物,通过PCR获取ChM-Ⅰ目的基因,分别将ChM-Ⅰ目的基因的PCR产物和pcDNA3.1(+)质粒双酶切,并将两者定向连接,构建pcDNA3.1(+)/ChM-Ⅰ质粒,转化感受态细菌,挑取阳性单克隆并扩增,酶切鉴定阳性克隆,并对插入的ChM-Ⅰ片段进行测序.结果:结果显示与ChM-Ⅰ基因长度相符,序列无误,且读码框正确.结论:成功构建pcDNA3.1(+)/ChM-Ⅰ表达质粒,为进一步研究ChM-Ⅰ的生物学作用打下基础.

关键词：软骨调节素Ⅰ;pcDNA3.1(+)质粒;肿瘤治疗

所属期刊栏目：35

分类号：R73-3(肿瘤学)

资助基金：天津市卫生健康委、天津市中医药管理局中医中西医结合科研课题2019129

在线出版日期：2022-03-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：544-547