A33抗体修饰的外泌体给药系统的构建及体外评价

摘要：

目的:构建A33抗体修饰的外泌体(exosomes,EXO)包载多柔比星(doxorubicin,DOX)给药系统并进行体外评价.方法:通过化学交联法将A33抗体与羧基化的超顺磁性纳米粒(ultrasmall superparamagnetic iron oxide nanoparticles,USPIO)连接制备探针(A33-USPIO),并利用动态光散射和红外光谱法对连接前后的USPIO进行表征.采用超速离心法分离出人结肠癌细胞株LIM1215细胞来源的EXO包载DOX,并通过透射电镜观察形态.用ELISA法测定EXO和探针结合的最适比例.透析法测定A33抗体修饰的载DOX的EXO给药系统(A33-US-EXO/DOX)体外释放特性.将不同的DOX制剂分别与LIM1215共培养后,用流式细胞仪测定细胞摄取DOX的情况,利用荧光显微镜验证A33-US-EXO/DOX的体外靶向能力.结果:透射电镜下EXO直径约为100 nm,2.5 μg探针约能与32 μg的EXO结合,结合后平均粒径为(187.83±6.76) nm,聚合物分散指数(polymer dispersity index,PDI)为0.21.在pH7.4、6.0、5.0条件下,DOX组、EXO/DOX组和A33-US-EXO/DOX组的48 h累积释药量分别为24.32％、34.07％、62.82％,细胞摄取效率分别为(13.10±1.08)％、(51.53±3.56)％和(85.11±3.91)％.荧光观察显示,A33 US EXO/DOX与A33抗原阳性的LIM1215细胞大量结合,而与A33抗原阴性的RAW264.7细胞结合较少.结论:本研究成功构建了A33抗原靶向的EXO给药系统,体外实验表明其具有较高的摄取效率和良好的靶向性.

关键词：A33抗体、超顺磁性纳米粒、外泌体、多柔比星

所属期刊栏目：18

分类号：R945(药剂学)

在线出版日期：2018-06-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：87-91,95