甘蔗宿根矮化病菌PCR检测体系的优化与应用

摘要：

为建立能快速灵敏检测甘蔗宿根矮化病(ratoon stuning disease,RSD)的PCR检测方法.本文通过改进模板DNA的制备方法,在PCR基本程序的基础上,以甘蔗宿根矮化病菌(Leifsonia xyli subsp.xyli,Lxx)16S-23SrDNA基因间隔区特异性引物,调整PCR扩增反应体系各组分的浓度、反应的退火温度、循环参数等主要因子,优化PCR反应体系.此检测体系能从感染RSD的样品中扩增出大小为438 bp的特异性片段,而阴性对照和未感染样品则未扩增出任何片断；未优化仅从稀释30倍的蔗汁总DNA中扩增出RSD的特异性片段,优化后可以从稀释3000倍的蔗汁总DNA中扩增出RSD的特异性片段.对31份田间采集样品检测,未优化的阳性检出率为32.26％；优化后阳性检出率74.19％,与I-ELISA检测结果一致.应用此检测方法可稳定、快速地检测出蔗株是否感染RSD,且检测效率高,适合于田间大批量样品快速检测.

关键词：甘蔗宿根矮化病菌、PCR检测、16S-23S rDNA、间接酶联免疫吸附法

所属期刊栏目：26

分类号：S435.661(病虫害及其防治)

资助基金：现代农业产业技术体系建设专项资金CARS-20-2-2;公益性行业农业科研专项资金nyhyzx07-019;云南省人才培养项目2008PY087

在线出版日期：2012-02-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：598-601