10.13597/j.cnki.maize.science.20200116
玉米质体型淀粉磷酸化酶抗体的制备
通过同源基因基因克隆、原核表达载体构建、GST融合蛋白诱导表达与纯化、新西兰大白兔免疫、抗血清分离和纯化制备了SPI多克隆抗体,并进行了玉米体内蛋白Western blot验证.结果 表明,成功构建的PGEX-6T-1-SPI-C表达载体在大肠杆菌中表达并纯化了GST-SPI-C融合蛋白,通过免疫新西兰大白兔制备并纯化了SPI多克隆抗体.制备的SPI多克隆抗体不但能识别GST-SPI-C融合蛋白,而且能识别玉米体内全长SPI蛋白(112 kD),并具有较好的特异性.玉米子粒和胚乳的Western blot检测表明,SPI蛋白主要积累在胚乳中,与mRNA定量结果一致.
玉米、淀粉磷酸化酶、载体构建、蛋白纯化、抗体制备
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S513.01(禾谷类作物)
国家自然科学基金;留学回国人员科技活动择优资助项目;四川省博士后特别资助项目
2020-04-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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