酸性蛋白酶pepB基因植物表达载体的构建及在玉米中的转化

付永平兰磊杨金慧王丕武王俊玲王巍

吉林农业大学;

摘要：

以黑曲霉基因组DNA为模板,利用聚合酶链式反应(PCR)技术扩增了酸性蛋白酶pepB基因序列,并将其克隆到pMD18-T Vector上,对重组子进行了PCR检测和限制性内切酶分析并测序.DNA序列分析表明:克隆片段长为1340bp,与已发表的pepB基因序列同源性达99.85%.将pepB基因片段插入到带有耐盐基因的表达载体pCAMBIA1301-BADH上,构建了无抗生素选择标记的重组质粒pB-pepB-35S,从而得到了植物表达载体,该载体利用耐盐基因BADH替代抗生素基因作为筛选标记.通过花粉管通道法将其导入玉米自交系,获得了转基因植株,并得到了转化植株的种子.

关键词：玉米、酸性蛋白酶pepB基因、选择标记、基因转化

所属期刊栏目：17

分类号：S513.035.3(禾谷类作物)

资助基金：国家转基因专项J992132001;吉林省重大科技攻关项目200402032222

在线出版日期：2009-09-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：39-42