NT-3真核过表达载体的构建及其在大鼠MSCs中的表达

摘要：

目的 构建pCDNA3.1-NT-3真核过表达载体,鉴定其在大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)中的表达.方法 从SD大鼠脑中提取并扩增NT-3基因,并将其克隆入pCDNA3.1中,构建pCDNA3.1-NT-3真核载体;原代培养大鼠间充质干细胞,将pCDNA3.1-NT-3通过Lip2000介导转染至大鼠MSCs;用RT-PCR、免疫荧光法、Western blot法检测NT-3在MSCs中的表达.结果 扩增的NT-3基因序列正确,并成功连接到真核载体pCDNA3.1中;转染MSCs后,RT-PCR、免疫荧光、Westernblot结果显示MSCs中过表达NT-3的mRNA和蛋白.结论 pCDNA3.1-NT-3真核载体构建成功,转染MSCs后能在细胞中正确过表达,为进一步NT-3基因修饰的MSCs治疗癫痫的研究奠定了实验基础.

关键词：NT-3、骨髓间充质干细胞、癫痫

所属期刊栏目：23

分类号：R329.2(人体形态学)

资助基金：广东省省级科技计划项目2013B021800191,2014A020212512;广州市属高校科研计划资助项目2012c128,2012D001

在线出版日期：2016-05-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：158-160