miR-34a-5p通过调控MDM4对糖尿病性白内障晶状体上皮细胞间质转化的影响
目的 探讨miR-34a-5p通过调控鼠双微体4(MDM4)对糖尿病性白内障晶状体上皮细胞(LEC)间质转化(EMT)的影响.方法 体外培养LEC,对LEC进行转染及双荧光素酶检测.实验分为对照组、高糖组、miR-NC组和miR-34a-5p抑制物组.采用MTT法和细胞划痕实验检测LEC 细胞增殖和迁移水平,采用酶联免疫吸附试验检测LEC 中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平,采用RT-qPCR检测LEC 中miR-34a-5p、MDM4、转化生长因子-β2(TGF-β2)mRNA 水平,采用Western blot检测LEC 中MDM4、TGF-β2、β-catenin和E-cadherin蛋白表达水平.结果 miR-34a-5 p对MDM4有潜在的结合位点.与对照组和miR-NC组相比,miR-34a-5p抑制物组LEC 中MDM4-MUT 荧光素酶活性均明显降低(均为P<0.05),对照组和miR-NC组LEC 中MDM4-MUT 荧光素酶活性差异无统计学意义(P>0.05);对照组、miR-NC 组及miR-34a-5p抑制物组LEC 中MDM4-WT 荧光素酶活性差异无统计学意义(P>0.05).与对照组相比,高糖组、miR-NC 组和miR-34a-5p抑制物组LEC 细胞增殖率、划痕愈合率、MDA、miR-34a-5p、TGF-β2 mRNA、TGF-β2蛋白和β-catenin蛋白均增加,SOD、MDM4 mRNA和蛋白、E-cadherin蛋白均降低(均为P<0.05);与高糖组和miR-NC 组相比,miR-34a-5p抑制物组LEC 细胞增殖率、划痕愈合率、MDA、miR-34a-5p、TGF-β2 mRNA和蛋白、β-catenin蛋白均降低,SOD、MDM4 mRNA 和蛋白、E-cadherin蛋白均增加(均为P<0.05);高糖组与miR-NC组LEC各指标差异均无统计学意义(均为P>0.05).结论 miR-34a-5p在糖尿病性白内障LEC 细胞模型中表达上调,下调miR-34a-5p可以靶向促进MDM4的表达,抑制高糖诱导的LEC的EMT进程.
miR-34a-5p、鼠双微体4、糖尿病性白内障、间质转化
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R776.1(眼科学)
2023-11-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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