地黄多糖对过氧化氢诱导的人晶状体上皮细胞氧化损伤的保护作用
目的 探讨地黄多糖对过氧化氢(H2 O2)诱导的人晶状体上皮细胞(HLEC)氧化损伤的保护作用及机制.方法 取对数生长期的B-3细胞(HLEC)作为研究对象.筛选H2 O2和地黄多糖最佳作用浓度.依据筛选的地黄多糖抑制H2 O2致B-3细胞损伤的最佳作用浓度处理细胞,将B-3细胞分为:空白组、H2 O2组和地黄多糖组.空白组:用10 g·L-1羧甲基纤维素钠预处理细胞24 h后,换为EMEM培养基培养24 h;H2 O2组:用10 g·L-1羧甲基纤维素钠预处理细胞24 h后,换为含100 mol·L-1 H2 O2的EMEM培养基培养24 h;地黄多糖组:用含40 mg·L-1地黄多糖的培养基预处理细胞24 h后,换为含100 mol·L-1 H2 O2的EMEM培养基培养24 h.采用扫描电镜和免疫荧光染色观察细胞焦亡情况;测定细胞活性氧(ROS)水平、丙二醛(MDA)含量及培养液中白细胞介素(IL)-1β、IL-18水平;Western blot检测NOD样受体蛋白3(NLRP3)/caspase-1途径相关蛋白表达水平.结果 100 mol·L-1 H2 O2和40 mg·L-1地黄多糖为最佳作用浓度.扫描电镜结果显示:空白组细胞呈圆球形,边界规则;H2 O2组细胞肿胀变大,边界不规则;地黄多糖组细胞肿胀程度减轻.与H2O2组相比,地黄多糖组切割消皮素D(GSDMD)-N阳性细胞数为每视野(5.33±0.46)个,GSDMD-N阳性细胞数显著减少(P<0.05).与H2O2组相比,地黄多糖组B-3细胞ROS水平、MDA含量显著降低(均为P<0.05).与H2 O2组相比,地黄多糖组培养液中IL-1β、IL-18含量降低(q=20.694、11.618,均为P<0.05).与H2O2组相比,地黄多糖组B-3细胞NLRP3蛋白表达水平及caspase-1/pro-caspase-1、GSDMD-N/GSDMD均降低(均为P<0.05).结论 地黄多糖可减轻H2 O2作用下B-3细胞的氧化损伤,其作用机制与抑制细胞焦亡有关.
地黄多糖、过氧化氢、人晶状体上皮细胞、NOD样受体蛋白3/caspase-1通路、细胞焦亡
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R776(眼科学)
梅州市医药卫生科研课题2015-B-22
2022-08-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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