H2O2对体外培养视网膜色素上皮细胞中BMP-6及其相关受体的影响
目的 观察氧化应激对视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞的损伤作用以及对骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)-6及其相关受体的影响.方法 RPE细胞随机分为对照组:正常培养的RPE细胞;H2O2组:加入200μmol·L-1 H2 O2处理的RPE细胞;实验组:加入200μmol·L-1 H2 O2和0.1 ng·L-1 BMP-6的RPE细胞.采用活性氧(reactive oxygen species,ROS)检测试剂盒运用流式细胞仪检测对照组与H2 O2组RPE细胞内ROS的变化,运用PCR及Western blot法检查对照组与H2 O2组BMP-6基因及蛋白水平的变化;TUNEL染色法观察三组细胞凋亡的变化,并运用PCR及Western blot法观察三组BMP受体及其共受体尤文素(Hemojuvelin,HJV)的变化.结果 H2O2组ROS水平(99.25±0.28)％较对照组(70.55±7.71)％明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);H2O2组相对于对照组BMP-6 mRNA水平及BMP-6蛋白水平均降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05);H2 O2组的TUNEL染色阳性细胞数显著高于对照组(P<0.05),而实验组TUNEL染色阳性细胞数明显减少,与H2O2组相比,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,H2 O2组BMP三种相关受体的BM-PR1 A、BMPR1 B及HJV的表达水平显著降低,而实验组三种受体表达水平较H2 O2组显著升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05).结论 H2O2导致RPE细胞ROS增加,氧化应激可在基因及蛋白水平抑制BMP-6的表达;BMP-6可减轻氧化应激引起的细胞凋亡,且可能是通过激活其相关受体起作用的,这为探索年龄相关性黄斑变性的发病机制提供了一定的理论基础.
骨形态发生蛋白、氧化应激、视网膜色素上皮细胞、年龄相关性黄斑变性
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R774(眼科学)
国家自然科学基金项目;陕西省重点研发计划项目;西安市科技计划项目[编号:201805097YX5SF315;西安交通大学医学院第一附属医院基金项目
2020-04-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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