Mfn2在TGF-β2诱导的晶状体上皮细胞上皮-间质转化中的作用
目的 研究线粒体融合蛋白基因2(mitofusin 2,Mfn2)在转化生长因子 β2(transforming growth factorβ2,TGF-β2)诱导的人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,HLECs)发生上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程中的表达及作用.方法 实时荧光定量PCR检测不同浓度(10 ng·mL-1、50 ng·mL-1、100 ng·mL-1)TGF-β2处理HLECs 24 h后,各TGF-β2处理组与对照组(0 ng·mL-1 TGF-β2)Mfn2 mRNA表达量差异.选取最佳作用浓度后,免疫荧光细胞化学检测TGF-β2处理组与对照组的Mfn2蛋白表达变化,实时荧光定量PCR和免疫荧光细胞化学检测分别验证TGF-β2处理组与对照组中E-钙黏蛋白(E-Cadherin)和波形蛋白(Vimentin)mRNA表达量和蛋白表达变化.Mfn2基因荧光表达载体(pEGFP-Mfn2)转染后实时荧光定量PCR和免疫荧光细胞化学检测分别验证转染组和对照组Mfn2、E-Cadherin和Vimentin mRNA表达量差异和蛋白表达变化.结果 TGF-β2处理组与对照组相比,E-Cadherin mRNA表达量减少;Vimentin、Mfn2的mRNA表达量均增加,且差异均有统计学意义(均为P<0.001).E-Cadherin蛋白表达降低,Vimentin、Mfn2的蛋白表达增加.成功转染Mfn2后转染组与对照组相比,E-Cadherin mRNA表达量下调,Vimentin mRNA表达量均增加,差异均有统计学意义(均为P<0.001).E-Cad-herin蛋白表达降低,Vimentin蛋白表达增加.结论 HLECs在发生EMT时Mfn2表达量上调,过表达Mfn2可使HLECs发生EMT.Mfn2参与了TGF-β2诱导的HLECs的EMT过程.
线粒体融合蛋白、转化生长因子β2、晶状体上皮细胞、上皮-间质转化
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R776.1(眼科学)
国家自然科学基金项目编号:81870644
2020-04-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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