miR-373在视网膜母细胞瘤Y79细胞中的表达及其抑制侵袭及迁移能力的实验研究
目的 观察miR-373在视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)细胞中的表达及其对RB Y79细胞侵袭及迁移能力的影响和相关机制.方法 采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-373在RB细胞系RB Y79、SO-RB50和人正常视网膜血管内皮细胞系ACBRI-181中的表达水平,并应用脂质体转染法将miR-373抑制物(miR-373抑制物组)和阴性对照(NC组)分别转染至Y79细胞,Transwell实验检测Y79细胞侵袭和迁移能力的变化,Western blot检测Y79细胞中上皮间质转化(epithelial-mes-enchymaltransition,EMT)相关标志物E-Cadherin、Vimentin和N-Cadherin蛋白的表达变化.结果 qRT-PCR结果显示,RB细胞系Y79、SO-RB50中miR-373的相对表达量分别为6.21±0.34、5.40±0.38,明显高于人正常视网膜血管内皮细胞系ACBRI-181中miR-373的相对表达量(1.02±0.04)(均为P<0.05).Transwell实验显示,miR-373抑制物组迁移细胞数(74±13)个,明显低于NC组(180±17)个(P<0.05),miR-373抑制物组侵袭细胞数(51±9)个明显低于NC组(113±14)个(P<0.05).West-ern blot结果显示,miR-373抑制物组E-Cadherin蛋白的表达(0.40±0.08)明显高于NC组(0.20±0.06)(P<0.05),Vimentin蛋白的表达(0.17±0.06)也明显低于NC组(0.51±0.10)(P<0.05),N-Cadherin蛋白的表达(0.12±0.06)也明显低于NC组(0.33±0.08)(P<0.05).结论 miR-373在RB细胞中表达异常增高,降低miR-373的表达能够通过调控EMT抑制RBY79细胞的侵袭和迁移能力,为RB的靶向治疗提供了新的潜在靶点.
视网膜母细胞瘤、miR-373、侵袭、迁移、上皮间质转化
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R774(眼科学)
2018-10-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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