腺伴随病毒介导绿色荧光蛋白基因对体外培养的鼠视网膜神经节细转染的实验研究

摘要：

目的 评价重组腺伴随病毒载体介导的绿色荧光蛋白基因(recombinant adenoassociated virus-mediated green fluorescence protein,rAAV-GFP)对体外培养的鼠视网膜神经节细胞(retinal ganglion cell,RGCs)的转染效率和安全性.方法 取出生24 h内的SD乳鼠的视网膜神经上皮层,行视网膜神经细胞的体外混合培养;培养2 d后,按转染倍数(multiple on infection,MOI)为10、102、103、104、105对细胞进行转染;5 d后行流式细胞仪检测细胞表达绿荧光的比率,并应用PE-Thy1.1抗体标记RGCs,评价不同MOI的rAAV-GFP对RGCs的转染效率.应用MTT比色方法检测各组细胞的生长活性.结果 MOI为10、102、103、104、105时,对混合培养的全体细胞的转染效率分别为6.4%、15.6%、20.2%、45.1%和65.8%,其中对RGCs的转染效率分别为11.7%、22.5%、27.7%、52.0%和75.3%;rAAV-GFP转染RGCs后,细胞生长状态正常;MTT比色结果显示,各转染细胞和未转染细胞的光吸收值无显著性差异(P＞0.05).结论 rAAV作为体外培养的SD乳鼠RGCs转染的载体是安全可行的,且对细胞生长无明显影响.

关键词：重组腺伴随病毒载体、绿色荧光蛋白、视网膜神经节细胞、细胞转染

所属期刊栏目：26

分类号：R774.1;Q959.836(眼科学)

在线出版日期：2006-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：737-739