硫辛酰胺对糖尿病大鼠肾组织中TAK1活性和SnoN蛋白稳定性的影响

摘要：

目的 观察硫辛酰胺(alpha-lipoamide,ALM)对糖尿病(diabetes Mellitus,DM)大鼠肾组织中转化生长因子β激活激酶1(TGFβ-activated-kinase1,TAK1)活性和核转录共抑制因子(ski-related novel protein N,SnoN)蛋白稳定性的影响,探讨硫辛酰胺抗肾脏纤维化的作用及其可能机制.方法 复制糖尿病(DM)大鼠模型,分为对照组NC(normalcontrol,NC)、DM组及ALM治疗组,实验6周后处死全部大鼠,测定相应生化指标,观察肾组织病理改变;免疫组化和Western blot检测TAK1、p-TAK1 (Thr184/187) (phosphoryladon-TGF β-activated-kinase1 (Thr184/187),p-TAK1(Thr184/187)、SonN、转化生长因子-β 1(trans-forminggrowth factor-β 1,TGF-β 1)、胶原Ⅳ(collagen-Ⅳ)的蛋白水平;免疫共沉淀技术(Co-immunoprecipitation,Co-IP)检测SnoN泛素化水平.结果 (1)与NC组相比,DM组24h尿蛋白(urinary protein,UP)、血糖(blood glucose,BG)、甘油三酯triglyceride (TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)显著增高;ALM组以上指标较DM组显著降低.(2)苏木精—伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)、Masson染色结果显示,DM组大鼠出现肾纤维化改变,ALM组肾纤维化病变明显改善.(3)与NC组相比,DM组大鼠肾组织TGF-β 1、Collagen Ⅰ、TAK1、p-TAK1 (Thr184/187)表达及SnoN泛素化水平增加,但SnoN蛋白水平降低;而与DM组相比,ALM组大鼠肾组织TGF-β1、Collagen Ⅰ、TAK1、p-TAK1 (Thr184/187)蛋白表达及SnoN泛素化水平降低,而SnoN蛋白水平有所恢复.结论 糖尿病大鼠肾组织中TAK1蛋白表达和活化水平均增加,可能通过介导SnoN磷酸化后被泛素化并降解,使TGF-β1致纤维化效应级联放大,促进DN的发生发展;而硫辛酰胺治疗后可通过减少TAK1的表达和磷酸化、降低SnoN泛素化水平,使得SnoN蛋白水平恢复而发挥抗肾脏纤维化效应.

关键词：糖尿病肾病、SnoN、TAK1、硫辛酰胺

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分类号：R151.2(营养卫生、食品卫生)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81541102;贵州省科技厅联合基金No.黔科合LH字[2015]7335贵阳市科技局基金筑科合同[20151001]社14号

在线出版日期：2018-06-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：47-52