CUT&Tag技术在代谢组织细胞的实验操作

摘要：

染色体靶向切割和标签化(clevage under target and tagment,CUT&Tag)技术利用Tn5转座酶与Protein A/G的融合蛋白,引导Tn5酶至与靶蛋白结合的抗体附近,对靶蛋白结合的附近染色质区域进行切割,随后通过标签化处理对片段化染色质进行文库制备,并利用高通量测序技术获取特定位点或蛋白质结合位置的染色质信息.CUT&Tag技术在蛋白质和DNA相互作用的研究领域起到了重大作用,不仅可以了解组蛋白修饰发生的位置,而且可以明确转录因子结合的区域.相较于传统的染色质免疫沉淀高通量测序(chromatin immunoprecipitation-sequencing,ChIP-seq)技术,CUT&Tag技术具有信噪比高、可重复性好、实验周期短、细胞投入量低等优点,在早期胚胎发育、干细胞、肿瘤以及表观遗传学等研究领域体现出巨大优势.本文将针对CUT&Tag在代谢组织细胞(以小鼠原代胰岛细胞为例)的具体操作步骤进行描述,以提供一种研究代谢细胞的表观遗传学方法.

关键词：CUT&Tag、组蛋白修饰、操作步骤、代谢组织细胞

所属期刊栏目：44

分类号：G633.7;O652;Q95-33

资助基金：国家自然科学基金;国家重点研究发展计划;国家重点研究发展计划;国家自然科学基金;国家优秀青年科学基金项目;浙江省自然科学基金;浙江大学基础医学创新研究院;中央高校基本科研专项基金;杭州市医学重点学科建设基金;王宽诚教育基金

在线出版日期：2022-11-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：958-966