利用谱系追踪方法探究Lgr5在胰腺组织及其类器官中的表达
富含亮氨酸重复序列G蛋白偶联受体5(leucine-rich repeat containing G protein-coupled receptor 5,Lgr5)在体内分布广泛,可以作为多种上皮组织(包括小肠、结肠、胃和毛囊)中干细胞的标记物.为了探究小鼠(Mus musculus)胰腺发育过程中导管上皮细胞及体外培养的胰腺导管类器官中Lgr5的表达情况,本研究利用Lgr5-CreERT2+/–和Rosa26-mTmG杂交后的转基因小鼠,经Tamoxifen(他莫昔芬)诱导后,观察不同发育阶段胰腺组织切片的荧光表达情况,并通过三维培养建立成体小鼠胰腺导管类器官,观察诱导后类器官细胞中的荧光变化.结果显示:Tamoxifen诱导的正常成体转基因小鼠胰腺导管内未检测到表达Lgr5的细胞;通过对孕鼠及哺乳母鼠注射Tamoxifen,在胚胎发育15.5 d和新生小鼠胰腺中也未发现Lgr5阳性细胞;但是将4-hydroxy-Tamoxifen(4-羟基–他莫昔芬)添加到培养基中,在Lgr5-CreERT2+/–;Rosa26-mTmG转基因小鼠胰腺导管来源的类器官中检测到部分细胞表达Lgr5.本研究结果证实,在成体及胚胎胰腺组织中没有检测到Lgr5表达,但在体外培养的胰腺导管类器官细胞中检测到Lgr5表达.本研究为探索胰腺发育过程中干/祖细胞特异性表达基因奠定了基础.
胰腺、导管、Lgr5、类器官、谱系追踪
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R737.9;R322.81;TP311.52
国家自然科学基金32072801
2022-06-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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