农杆菌介导的高效玉米遗传转化体系的建立
为了建立玉米高频再生及高效遗传转化体系,对影响玉米胚性愈伤组织诱导的11个因素及影响胚性愈伤分化的9个因素用正交实验方法进行研究.结果显示,基因型对胚性愈伤诱导有极显著影响.6-BA.培养基、AgNO3、2,4-D、ABA对胚性愈伤诱导的影响达到显著水平.多重比较分析显示ABA 2 mg/L每间隔1代添加对胚性愈伤诱导率有显著影响.在影响分化的因素中,基因型和6-BA浓度表现出极强的主效应,NAA、培养基、KT、2,4-D对分化产生显著影响.Southern blotting分析表明,25 mg/L潮霉素选择压下抗性愈伤率作为转化体系优化指标是可靠的.在影响转化效率的因素中,acetosyringone(AS)使用浓度因基因型不同而表现出敏感度差异,共培养温度24~25℃、农杆菌浓度和浸泡时间0.7 OD×15 min,以及pH值5.5~6.2是最高转化率的优选组合.在整合后的玉米遗传转化体系中,黄早4和综31自交系以抗性愈伤率为指标的GUS基因稳定转化率分别达到48.6%和46.2%.
玉米、正交实验、胚性愈伤诱导率、抗性愈伤率、农杆菌介导、遗传转化率
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S51;S79
福建省自然科学基金项目B0810040;福建省教育厅A类科技项目JA08154
2010-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共13页
1158-1170