甲型肝炎病毒衣壳蛋白融合基因植物表达载体的构建与遗传转化柑橘的研究

摘要：

基因工程领域的研究进展使得植物体成为具有重要经济价值的药用蛋白的生产体系.以含甲型肝炎病毒结构基因cDNA的克隆载体pCDNAⅡA16为模板,用甲型肝炎病毒衣壳蛋白融合基因特异引物进行PCR扩增,得到全长2.2kb衣壳蛋白融合基因序列.经测序鉴定后正向克隆于植物表达载体pBI121中,衣壳蛋白融合基因位于pBI121质粒T-DNA左右边界区间内,处于CaMV35S启动子控制之下.经限制性内切酶分析和PCR鉴定后利用冻融法将重组质粒pBI121-A导入根癌农杆菌LBA4404.以锦橙 (Citrus. Sinensis Osbeck) 上胚轴为转化材料,通过根癌农杆菌介导法将衣壳蛋白融合基因转化到植物基因组中.120株转化外植体经卡那霉素50 mg/L筛选,其中13株生长状况良好未出现白化现象的拟转化芽微嫁接到实生砧木继续培养.PCR分析证明,13株拟转化植株中有5株植物基因组中已导入甲型肝炎病毒衣壳蛋白融合基因,转化率为4.1%.此研究是对遗传转化柑桔表达外源蛋白的初步探讨,为进一步研究食用疫苗开辟了新途径.

关键词：甲型肝炎病毒衣壳蛋白融合基因、柑橘、植物表达载体、遗传转化、食用疫苗

所属期刊栏目：26

分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)

资助基金：重庆市科委资助项目

在线出版日期：2004-09-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：425-431