10.3760/cma.j.issn.2096-2932.2022.05.014
内皮前体细胞来源外泌体减轻新生大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞高氧损伤的研究
目的:探讨内皮前体细胞(endothelial progenitor cell,EPC)来源外泌体对高氧诱导的新生大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(type Ⅱ alveolar epithelial cells,AECⅡ)损伤的干预作用。方法:使用全外泌体分离试剂盒从大鼠EPC培养液中提取外泌体,将体外培养的新生大鼠AECⅡ分为对照组、高氧组、干预组。对照组为空气+5%CO
2培养,高氧组为95%O
2+5%CO
2培养,干预组培养基中加入0.1 mg/ml EPC来源外泌体,并予95%O
2+5%CO
2培养。于2、4、6 d使用细胞增殖及毒性检测试剂盒检测AECⅡ活力、流式细胞仪检测AECⅡ凋亡。
结果:透射电镜观察EPC培养上清中分离的外泌体均符合外泌体的形态学特征。Dil标记EPC来源外泌体后与AECⅡ共培养24 h,在荧光显微镜下可观察到AECⅡ胞浆中有Dil荧光,提示EPC来源外泌体可以被AECⅡ摄取进入胞浆。与对照组相比,高氧组AECⅡ活力受损,细胞凋亡增加,并且损伤程度随高氧时间延长而加重(
P<0.001)。EPC来源外泌体干预组细胞损伤程度低于高氧组(
P<0.001)。与对照组相比,干预组在高氧4 d、6 d时的细胞活力低于对照组(
P值分别为0.029、0.005),在高氧6 d时的细胞凋亡高于对照组(
P=0.007)。
结论:EPC来源外泌体干预可减轻高氧诱导对AECⅡ的损伤,但不能完全逆转损伤。
内皮前体细胞、外泌体、肺泡Ⅱ型上皮细胞、高氧、凋亡
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国家自然科学基金81401247;四川省科技厅应用基础研究2019Y30648;National Natural Science Foundation of China81401247;Sichuan Provincial Science and Technology Project Foundation2019YJ0648
2023-05-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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