褪黑素在缺氧缺血性脑损伤新生大鼠线粒体自噬中的作用

摘要：

目的 探讨褪黑素(melatonin,MT)在缺氧缺血性脑损伤(hypoxic ischemic brain damage,HIBD)新生大鼠线粒体自噬中的作用.方法 将45只7日龄Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为假手术组和HIBD组,假手术组于0h、HIBD组分别于模型制备完成后0、2、4、6、8、12、24、48 h取脑组织,检测线粒体自噬相关蛋白Bnip3及LC3-Ⅱ表达;将72只7日龄SD大鼠随机分为假手术组、HIBD组及HIBD后药物处理组(3-MA、Mdivi-1、Rapa、MT、3-MA+ MT、Mdivi-1+ MT、Rapa+ MT),观察脑梗死面积.孕17～19 d SD大鼠取胎鼠进行皮层原代细胞培养,检测线粒体膜电位,免疫荧光观察线粒体自噬情况;制备体外氧糖剥夺复氧(oxygen glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)模型,并予以自噬抑制剂3-MA、线粒体自噬抑制剂Mdivi-1、自噬激活剂Rapa,以及MT干预,检测细胞Bnip3、LC3-Ⅱ表达及细胞活性.结果 缺氧缺血后HIBD组脑组织可见明显白色梗死灶,3-MA和Mdivi-1组梗死灶更明显,Rapa组梗死灶减少,加入MT的各药物处理组梗死灶均减小(P＜0.05).与假手术组相比,HIBD组Bnip3、LC3-Ⅱ表达升高(P＜0.05);与正常细胞组相比,OGD/R组Bnip3、LC3-Ⅱ表达升高(P＜0.05),药物处理3-MA、Mdivi-1组细胞活性明显降低、线粒体膜电位降低、线粒体自噬减少(P＜0.05),药物处理Rapa组细胞活性增加、线粒体膜电位增加、线粒体自噬增加(P＜0.05),对各药物处理组增加MT干预后细胞活性均增加、Bnip3及LC3-Ⅱ表达升高(P＜0.05).结论 MT可通过增强线粒体自噬在新生大鼠HIBD早期发挥重要的保护作用,为后续具体相关机制的研究提供了理论依据.

关键词：缺氧缺血、脑、自噬、线粒体、褪黑素、大鼠

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资助基金：国家自然科学基金81471488、81502157、81671532、31500822、81771625、81501291;江苏省青年医学人才QNRC2016758、QNRC2016762、QNRC2016763;江苏省重点研发专项资金BE2015644;苏州市民生科技项目SS201536、SYS201765National Natural Science Foundation of China81471488,81502157,81671532,31500822,81771625,81501291;Jiangsu Young Medical TalentsQNRC2016758,QNRC2016762,QNRC2016763;Jiangsu Provincial Key Research and Development Special FundBE2015644;Suzhou Citizen Life Science and Technology ProjectSS201536,SYS201765

在线出版日期：2018-12-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：456-462