lncRNA BDNF-AS靶向miR-375调控氧化型低密度脂蛋白诱导的动脉粥样硬化模型细胞损伤实验研究

摘要：

目的 探讨长链非编码RNA 脑源性神经营养因子反义因子(lncRNA BDNF-AS)对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的动脉粥样硬化模型细胞损伤的影响及其对miR-375 的靶向调控作用.方法 体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),分别将lncRNA BDNF-AS小分子干扰RNA与miR-375 寡核苷酸模拟物及其阴性对照、lncRNA BDNF-AS小分子干扰RNA si-lncRNA BDNF-AS与miR-375 特异性寡核苷酸抑制剂阴性对照、si-lncRNA BDNF-AS与miR-375 特异性寡核苷酸抑制剂转染至HUVECs,并用ox-LDL处理 24 h;仅使用ox-LDL处理的细胞为ox-LDL组,正常细胞为Con组.采用qRT-PCR法检测lncRNA BDNF-AS、miR-375 的表达量;利用试剂盒检测丙二醛(MDA)的含量与超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的活性;流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告实验检测lncRNA BDNF-AS、miR-375的靶向关系.结果 与Con组比较,ox-LDL组lncRNA BDNF-AS的表达水平升高(t=26.180,P＜0.01),miR-375 的表达水平降低(t=32.413,P＜0.01);ox-LDL诱导的HUVECs中MDA含量、凋亡率升高(t=27.588、26.806,P＜0.01),SOD、CAT的活性降低(t=18.925、37.887,P＜0.01).转染lncRNA BDNF-AS小分子干扰RNA后,lncRNA BDNF-AS的表达水平、MDA含量、凋亡率降低(t=17.220、15.527、18.930,P＜0.01),SOD、CAT的活性升高(t=12.570、17.202,P＜0.01).双荧光素酶报告实验证实lncRNA BDNF-AS可靶向结合miR-375;转染miR-375 寡核苷酸模拟物可明显降低MDA的含量及凋亡率(t=11.945、20.881,P＜0.01),提高SOD、CAT的活性(t=15.859、13.102,P＜0.05).共转染si-lncRNA BDNF-AS和anti-miR-375后,MDA含量、凋亡率升高(t=10.712、15.218,P＜0.01),SOD、CAT的活性降低(t=7.961、10.773,P＜0.01).结论 抑制lncRNA BDNF-AS表达可上调miR-375 的表达而抑制ox-LDL诱导HUVECs氧化应激及细胞凋亡,从而减轻动脉粥样硬化模型细胞损伤.

关键词：长链非编码RNA脑源性神经营养因子反义因子、miR-375、氧化型低密度脂蛋白、动脉粥样硬化、氧化应激、凋亡

所属期刊栏目：23

分类号：R73;R363;R972+.6

资助基金：湖北省自然科学基金WJ2015Q037

在线出版日期：2023-10-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：25-28,53