体外全骨髓贴壁法培养人骨髓间充质干细胞的实验研究

摘要：

目的：探讨体外采用全骨髓贴壁法分离培养人骨髓间充质干细胞（human bone mesenchymal stem cells，hBMSCs）的可行性，为研究hBMSCs提供实验细胞来源。方法从因创伤导致骨折需行骨折复位及髂骨植骨术的志愿者中，获取骨髓，采用全骨髓贴壁法培养和分离hBMSCs，在倒置相差显微镜下观察细胞生长形态，取P3代细胞行表型鉴定；取P1、P2、P3代细胞，分别用胰蛋白酶消化，以培养时间为横轴，细胞数量为纵轴，绘制hBMSCs生长曲线图。结果经全骨髓贴壁法培养分离获得了纯度较高的hBMSCs，细胞呈均一的长梭形、短梭形及多角形，漩涡状或辐射状结构，绘制的生长曲线呈S形。P3代hBMSCs经流式细胞鉴定：CD29、CD44、CD90、CD105分别为99.6%、100%、99.4%、92.5%，呈阳性表达；而表达CD34、CD45分别为0.5%、0.6%，呈阴性表达。结论体外应用全骨髓贴壁培养法可成功分离hBMSCs，方法操作简单易行、经济，且能最大限度的保持细胞活力。

关键词：骨髓间充质干细胞、分离培养、全骨髓贴壁法、细胞培养

分类号：R322.2(人体形态学)

在线出版日期：2015-09-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：381-384