多次贴壁法高效制备人脐带间充质干细胞

摘要：

目的 建立一套简单、高效、稳定、规范的人脐带间充质干细胞体外制备与鉴定技术,为人脐带间充质干细胞库建设及临床应用提供技术规范.方法 改进前期技术方法,重复验证,建立规范化技术方法.无菌采集足月剖宫产分娩胎儿脐带,采用不剥离血管和包膜组织贴壁法培养脐带间充质干细胞.待原代细胞长出时,收集原本换液应丢弃的组织块,进行二次贴壁培养,如此反复,待二次贴壁组织块长出细胞时,收集组织块进行三次贴壁培养.对三次贴壁培养长出的第三代细胞进行生物学特性分析.结果 首次组织贴壁后10～12 d可见成纤维样细胞从组织块爬出,二次、三次贴壁后第2d就可见成纤维细胞样细胞爬出,且生长状况好,细胞形态更为均一.三次贴壁培养的第三代细胞都高表达CD29、CD44、CD90和CD105,不表达CD34和CD45.细胞生长曲线呈“S”型,均具有成脂、成骨、成软骨分化的能力.结论 采用多次贴壁法制备的人脐带间充质干细胞充分利用了脐带组织块,且得到的原代细胞数量翻倍,其生物学特性稳定.

关键词：脐带间充质干细胞、分离、贴壁培养

所属期刊栏目：25

分类号：R318.1(医用一般科学)

资助基金：国家科技支撑计划2014BI01B0;云南省战略性新兴产业专项2013DA004;云南省科技创新平台建设项目2013DA004

在线出版日期：2015-09-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：828-831