胰高血糖素样多肽 - 2的重组表达及鉴定

摘要：

目的:构建胰高血糖素样多肽 - 2(GLP - 2)原核表达载体,在大肠杆菌BLR(DE3)中表达,为胰GLP - 2的作用机制的探究奠定基础.方法:人工合成GLP - 2序列,磷酸化后连接到质粒pET31b(+),构建成功的质粒GLP - 2/pET31b(+)转化至BLR(DE3)进行诱导表达,优化条件获得最大表达产量;纯化重组蛋白,溴化氰裂解蛋白获得单体蛋白,SDS - PAGE、Western blotting鉴定重组蛋白.结果:成功合成GLP - 2序列,与Genebank收录序列一致;构建原核表达质粒GLP - 2/pET31b(+),测序成功;37℃,OD600 nm为0.8时,加入1 mmol/L的IPTG诱导表达获取较纯的GLP - 2重组蛋白产量较高,溴化氰裂解获得了蛋白的单体.结论:成功构建GLP - 2原核表达载体,该蛋白具有生物活性.确定了优化表达条件,获得了具有生物活性的GLP - 2单体蛋白,为进一步研究奠定基础.

关键词：胰高血糖素样多肽-2、原核表达、重组蛋白

所属期刊栏目：19

分类号：R587.1(内分泌腺疾病及代谢病)

在线出版日期：2009-11-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：875-878