少突胶质细胞祖细胞高效分离培养及EGFP基因转染

摘要：

目的:建立高效分离少突胶质细胞祖细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPCs)的方法,并转染增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因.方法:采用2次接种培养和差速振荡分离,结合使用神经营养因子(bFGF、PDGF-AA),体外分离纯化和扩增培养OPCs,用抗A2B5、GFAP、CNPase免疫荧光抗体鉴定细胞类型.采用脂质体介导EGFP基因转染OPCs,筛选获得稳定表达EGFP的OPCs细胞.结果:分离培养的OPCs细胞呈A2B5阳性,纯度达到99%,具有增殖和双向分化的潜能(GFAP阳性的2型星形胶质细胞和CNPase阳性的少突胶质细胞),传代培养1个月仍具有增殖能力.EGFP基因转染后OPCs细胞能发出绿色荧光,并继续保持增殖分化特性.结论: 二次接种培养和差速振荡分离法可获得高纯度OPCs细胞;EGFP基因转染可作为示踪OPCs迁移的有效方法.

关键词：少突胶质细胞祖细胞、细胞培养、增强型绿色荧光蛋白、基因转染

所属期刊栏目：18

分类号：Q813.11;R651(生物工程学(生物技术))

资助基金：重庆市自然科学基金CSTC2005BB5027;第三军医大学军队人员回国基金

在线出版日期：2008-05-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：4-7,封4