结核分枝杆菌Rv2389c基因的克隆和原核表达

摘要：

目的:克隆并原核表达结核分枝杆菌Rv2389c基因.方法:培养结核分枝杆菌,提取其基因组,PCR扩增出485bp的Rv2389c基因,克隆入pSP73载体,测序分析.将该目的基因亚克隆入pGEX-4T-2表达载体,测序证实正确后转化大肠杆菌BL21(DE3),待大肠杆菌增菌至A600nm值为0.6时,用0.3 mmol/LIPTG在30℃诱导表达重组蛋白.结果:测序结果证实获得了Rv2389c基因,其序列与GenBank中报道完全一致.构建了重组表达质粒,表达的蛋白以12%SDS-PAGE分析,在Mr约42KD处出现一条新生蛋白带,经凝胶薄层扫描检测,表达量约占菌体蛋白的26.8%.结论:成功克隆了结核分枝杆菌Rv2389c基因并得到了其大肠杆菌表达产物,为进一步研究其活性和功能奠定了基础.

关键词：结核分枝杆菌、促进复活因子、克隆、表达

所属期刊栏目：16

分类号：R378.9(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2006-04-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：25-27