牛IFN-α、IFN-β荧光定量PCR检测方法的建立

摘要：

建立一种检测牛IFN-α、IFN-β基因SYBY Green I实时荧光定量PCR方法,旨在为抗病毒相关研究奠定基础.设计合成扩增牛IFN-α、IFN-β基因的特异性引物,采用RT-PCR从牛脾脏中扩增出目的DNA片段,将其克隆至pMD18-T载体获得牛IFN-α、IFN-β质粒标准品,以质粒标准品为模板,优化荧光定量PCR反应条件,建立牛IFN-α、IFN-β基因SYBY Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法,结果表明,牛IFN-α、IFN-β标准曲线的R2分别为0.958 8和0.996 52,线性良好;扩增效率为0.97和0.91,效率高;熔解曲线均为单峰,特异性较高,并具有良好的重复.结果 证实,本研究所建立的方法敏感性高,特异性强,重复性好.

关键词：牛、IFN-α、IFN-β、荧光定量PCR

所属期刊栏目：39

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：四川省科技厅应用基础研究面上项目;四川省教育厅自然科学重点项目;西昌学院“双高”项目

在线出版日期：2020-11-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：10-14