奶牛结核病IFN-γ基因的克隆及其在E.coli BL21(DE3)中的高效表达

摘要：

动物机体内γ-干扰素(IFN-γ)是可被多种物质诱导产生的生物活性蛋白,克隆和诱导表达奶牛结核病IFN-γ蛋白,对于采用ELISA诊断牛结核病有着重要意义.本研究利用RT-PCR方法克隆了奶牛结核病IFN-γ基因,并成功构建了IFN-γ基因的原核表达载体重组质粒pET28a-IFN-γ,转入E.coli BL21 (DE3)中进行诱导表达,并对条件进行了优化.SDS-PAGE与West-ern Blot结果显示,在37℃条件下,0.75mmol/L IPTG诱导4h可见重组蛋白BovIFN-γ大量表达.本研究成功建立了利用原核表达系统获得牛IFN-γ蛋白的方法,对后续利用该蛋白作为免疫原,从而建立ELISA诊断方法奠定了基础.

关键词：奶牛、结核病、IFN-γ基因、原核表达

所属期刊栏目：34

分类号：S852.61+8(动物医学（兽医学）)

资助基金：甘肃省农业科技创新项目GNCX-2011-43

在线出版日期：2015-02-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：18-21