利用SMART技术构建羊驼皮肤全长cDNA文库

摘要：

为了快速、经济和有效地寻找新基因,利用大规模测序及分析技术构建羊驼皮肤组织的基因表达谱,实验构建了羊驼皮肤cDNA文库.Trizol提取皮肤总RNA后,用SMART法构建文库:经反转录反应合成第一链cDNA,用LD PCR法将第一链产物再合成第二链和双链cDNA;经蛋白酶K和Sfi消化后,用CHROMA APIN-400分离双链cDNA;将合适大小的ds cDNA通过16℃过夜孵育使其转入到载体中,将重组产物在22℃下用λ-phage孵育2h进行包装,制成文库.该cDNA文库的特征为:包装效率为106(pfu/mL),重组率在80%以上.该cDNA文库质量可达到进行后续研究的要求.

关键词：全长cDNA文库、SMART技术、羊驼皮肤

所属期刊栏目：27

分类号：Q785(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金30571070;山西省科技攻关项目2006031060

在线出版日期：2009-02-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：8-11