基于PI3K/Akt/mTOR信号通路探讨益肾疏肝汤对卵巢储备功能减退大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴及卵巢颗粒细胞凋亡的影响

摘要：

目的 基于磷脂酰肌醇 3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路观察益肾疏肝汤对卵巢储备功能减退(DOR)大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴及卵巢颗粒细胞凋亡的影响.方法 筛选动情周期正常的SD雌性大鼠32 只,随机选取8 只作为空白组,其余大鼠给予雷公藤多苷片混悬液50 mg/(kg·d)连续灌胃14d建立DOR模型.将造模成功大鼠随机分为模型组、益肾疏肝中剂量组、益肾疏肝高剂量组,每组8 只.益肾疏肝高、中剂量组分别给予益肾疏肝汤生药32.76 g/kg、16.38 g/kg灌胃,空白组和模型组给予等体积生理盐水灌胃,均每日1 次,连续灌胃15 d.观察4 组大鼠的动情周期,取血检测性激素[促性腺激素释放激素(Gn-RH)、促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、抗苗勒管激素(AMH)]水平,HE染色观察卵巢组织形态,免疫组化检测卵巢颗粒细胞内Bcl-2、Bax蛋白阳性表达情况,Western blot法检测卵巢组织中PI3K、Akt、mTOR蛋白表达情况.结果 与空白组比较,模型组大鼠动情周期延长、紊乱;血清GnRH、FSH、LH水平均明显升高(P均<0.05),血清E2、AMH水平均明显降低(P均<0.05);卵巢组织中生长卵泡数量明显减少,闭锁卵泡数量增多;卵巢颗粒细胞内Bcl-2 蛋白阳性表达评分明显降低(P<0.05),Bax 蛋白阳性表达评分明显升高(P<0.05);卵巢组织中PI3K、Akt、mTOR蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05).与模型组比较,益肾疏肝中、高剂量组大鼠动情周期缩短、趋于正常,血清GnRH、FSH、LH水平均明显降低(P 均<0.05),血清E2、AMH水平均明显升高(P均<0.05);卵巢组织中生长卵泡与成熟卵泡数量增加,闭锁卵泡减少;卵巢颗粒细胞内Bcl-2 蛋白阳性表达评分均明显升高(P均<0.05),Bax蛋白阳性表达评分均明显降低(P均<0.05);卵巢组织中PI3K、Akt、mTOR蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05).结论 益肾疏肝汤能调节DOR大鼠的性激素水平,改善卵巢病理变化,提高卵巢储备功能,其机制可能与激活PI3K/Akt/mTOR信号通路,调控Bcl-2 和Bax表达,从而抑制卵巢颗粒细胞凋亡有关.

关键词：卵巢储备功能减退、益肾疏肝汤、磷脂酰肌醇3-激酶、蛋白激酶B、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白、下丘脑-垂体-卵巢轴

所属期刊栏目：32

分类号：R-332(医学研究方法)

资助基金：国家自然科学基金;首都卫生发展科研专项自主创新项目;北京市属医院科研培育计划项目

在线出版日期：2023-06-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1023-1029