TRPV1基因过表达逆转录病毒载体的构建和鉴定

摘要：

目的 TRPV1基因过表达逆转录病毒载体的构建和鉴定研究.方法 PCR法扩增TRPV1基因的编码序列,克隆到pBaBe-puro载体上.对重组质粒进行DNA序列测定和酶切分析.用磷酸钙法制备pBaBe-puro-TRPV1逆转录病毒,将其感染到U87-MG细胞,经嘌呤酶素筛选阳性克隆后用荧光定量PCR和Western blot法检测TRPV1表达.结果 经DNA测序和酶切鉴定表明,pBaBe-puro-TRPV1表达载体构建成功.pBaBe-puro-TRPV1逆转录病毒感染U87-MG细胞后,细胞中TRPV1表达量明显增高.结论 成功构建了人TRPV1基因的pBaBe-puro-TRPV1表达载体.pBaBe-puro-TRPV1能有效上调TRPV1基因在U87-MG细胞中的表达,为应用其研究TRPV1在利多卡因致细胞损伤中的作用奠定了基础.

关键词：瞬态电压感受器阳离子通道、利多卡因、逆转录病毒

所属期刊栏目：16

分类号：R394.2;R373.9

资助基金：国家自然科学基金81260176

在线出版日期：2016-09-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：795-797,801