10.3969/j.issn.1672-2159.2024.05.012
CircCSNK1G1调节miR-381-3p/Skp2轴对胃癌细胞增殖、凋亡和迁移的研究
目的 探究CircCSNK1G1调节miR-381-3p/S期激酶相关蛋白2(Skp2)轴对胃癌(GC)细胞增殖、凋亡和迁移的影响.方法 将 HGC-27 细胞分为未转染组、si-NC 组、si-CircCSNK1G1 组、si-CircCSNK1G1+anti-miR-NC 组、si-CircCSNK1G1+anti-miR-381-3p 组.qRT-PCR 分别检测 GC 肿瘤组织和 GC 不同细胞系中 CircCSNK1G1、miR-381-3p、Skp2 mRNA 的表达;MTT法检测细胞增殖;克隆形成实验检测细胞克隆数量;流式细胞术检测细胞凋亡;Transwell小室法测定细胞迁移和侵袭能力;Western Blot检测EMT相关蛋白E-cadherin、Vimentin的表达;双荧光素酶实验验证CircCSNK1G1、miR-381-3p、Skp2三者的靶向关系.结果 与癌旁组织和人正常胃黏膜上皮细胞GES-1相比,GC肿瘤组织和GC细胞系中的CircCSNK1G1、Skp2 mRNA高表达,miR-381-3p低表达(P<0.05),且HGC-27细胞中miR-381-3p表达水平最低,CircCSNK1G1、Skp2 mRNA表达最高,因此后续选用HGC-27细胞并敲低CircCSNK1G1进行实验.与未转染组和si-CircCSNK1G1-NC组相比,转染si-CircCSNK1G1能够降低HGC-27细胞中CircCSNK1G1、Skp2 mRNA表达、细胞增殖活性、细胞迁移数以及Vimentin蛋白表达(P<0.05),提高miR-381-3p的表达、细胞凋亡率和E-cadherin蛋白表达(P<0.05).双荧光素酶实验验证了 CircCSNK1G1、Skp2均与miR-381-3p存在靶向关系,而且CircCSNK1G1可作为miR-381-3p的海绵RNA,进一步调节Skp2的表达和活性.结论 敲低CircCSNK1G1能够靶向上调miR-381-3p表达,抑制Skp2表达,进而促进GC细胞凋亡,抑制其增殖和迁移.
CircCSNK1G1、胃癌、miR-381-3p、Skp2、增殖、凋亡、迁移
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R735.2;R573(肿瘤学)
河北省卫生健康委员会科研项目20191348
2024-09-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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572-577