五味子甲素通过ATP结合盒转运子B1逆转胶质瘤干/祖细胞耐药性研究

摘要：

目的 探讨五味子甲素对胶质瘤干/祖细胞耐药性的影响及作用机制.方法 自人胶质瘤细胞系SHG-44中分离培养胶质瘤干/祖细胞SHG-44s,予五味子甲素0、12.50、25.00和50.00 μmol/L联合长春新碱400、800和1200 nmol/L,细胞活性检测试剂盒CCK-8细胞毒性实验检测SHG-44s细胞增殖活性,罗丹明123染色检测SHG-44s细胞泵出药物能力,实时聚合酶链反应(PCR)和Western blotting法检测SHG-44s细胞ATP结合盒转运子B1(ABCB1)基因转录和翻译能力.结果 五味子甲素50 μmol/L即可抑制SHG-44s细胞增殖活性(P=0.001,0.001,0.039),剔除这一浓度后无论长春新碱浓度为400、800或1200 nmol/L,联合应用五味子甲素均可抑制SHG-44s细胞增殖活性(长春新碱400 nmol/L组:P=0.007,0.001;长春新碱800 nmol/L组:P=0.001,0.000;长春新碱1200 nmol/L组:P=0.000,0.000).倒置荧光显微镜观察,五味子甲素12.50 μmol/L组和25.00 μmol/L组SHG-44s细胞可见明显绿色荧光.流式细胞术显示,随着五味子甲素浓度的增加,SHG-44s细胞罗丹明123染色阳性细胞比例分别为10.40％、39.20％和45.20％.实时PCR法显示,五味子甲素12.50μmol/L组和25.00μmol/L组SHG-44s细胞ABCB1基因表达水平较0μmol/L组降低(P=0.027,0.006),尤以25.00μmol/L组显著(P=0.034).Western blotting法显示,随着五味子甲素浓度的增加,SHG-44s细胞P-糖蛋白表达水平下降.结论 五味子甲素通过抑制胶质瘤干/祖细胞表面已存在的ABCB1基因编码的P-糖蛋白泵出药物能力并降低ABCB1基因转录和翻译能力,逆转胶质瘤干/祖细胞耐药性.

关键词：五味子素、ATP结合匣式转运子、神经胶质瘤、肿瘤干细胞、药物耐受性、显微镜检查、荧光、流式细胞术、聚合酶链反应、免疫印迹法、肿瘤细胞、培养的

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分类号：R73;R6

资助基金：上海市卫生和计划生育委员会科研课题201540412;上海市浦东医院基金资助项目201313;上海市浦东医院2012年度优秀人才“南菁奖”项目This study was supported by Scientific Research Project of Shanghai Municipal Commission of Health and Family Planning201540412;Funded Project of Shanghai Pudong Hospital201313;Personnel Training Program "Nanjing Award 2012" of Shanghai Pudong Hospital

在线出版日期：2017-08-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：439-445