细胞外基质蛋白介导膀胱癌化疗耐药的研究

摘要：

目的：研究细胞外基质中的一种主要蛋白：纤维连接蛋白（F N ）介导的人膀胱癌细胞（T24）对化疗药物丝裂霉素（MMC）的耐药现象，并阐明其发生的信号转导机制。方法 T24细胞与FN黏附后予以MMC处理及磷脂酰肌醇3‐激酶（PI3‐K）特异性抑制剂LY294002处理，分别检测其细胞凋亡及细胞周期情况。分别采用比色法、免疫荧光、蛋白印迹法及流式细胞术等技术检测Caspase‐8、Caspase‐9、凋亡诱导因子（AIF）3种凋亡通路的激活情况。蛋白印迹法检测细胞周期G1／S期转换的关键分子糖原合成激酶3β（GSK‐3β）、Cyclin D1的表达水平。同时利用蛋白印迹法检测PI3‐K／Akt信号通路的激活情况。结果 FN与 T24细胞黏附后显著抑制了MMC诱发的细胞凋亡，且这种作用是通过抑制Caspase‐9及AIF两种凋亡通路而非Caspase‐8凋亡通路实现的。同时，FN通过失活GSK‐3β而稳定了Cyclin D1的表达水平，从而拮抗了MMC诱导的 T24细胞G1／S期停滞。FN介导的对 T24细胞的保护作用是 PI3‐K／Akt依赖的，可以被LY294002阻断。

关键词：纤维连接蛋白、膀胱癌、化疗、耐药性

分类号：R73;R96

资助基金：国家自然科学基金项目81101931；上海高校青年教师培养计划ZZjdyx12083；上海市卫生局青年科研项目2010Y073

在线出版日期：2015-09-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：165-170