千金藤素基于Akt/mTOR通路诱导宫颈癌细胞自噬

摘要：

目的 探讨千金藤素基于蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)通路诱导宫颈癌细胞自噬的作用机制.方法 取人宫颈癌 HeLa 细胞株进行培养、传代,千金藤素低剂量、中剂量及高剂量组分别以15、30、60 μmol·L-1 千金藤素处理,对照组以等量生理盐水处理.检测细胞增殖活性、细胞凋亡率及自噬溶酶体的数量;检测微管相关蛋白 1 轻链 3-Ⅱ(microtubule-associated protein 1 light chain 3 Ⅱ,LC3-Ⅱ)、Bcl-2 同源结构域蛋白(Bcl-2 homologous domain protein,Beclin1)及 p62 mRNA的表达;检测细胞磷酸化丙酮酸脱氢酶激酶同工酶 1(phosphorylated pyru-vate dehydrogenase kinase 1,p-PDK1)、磷酸化 Akt(phosphorylated Akt,p-Akt)、磷酸化磷脂酰肌醇-3 激酶(phosphorylated phosphatidylinositol 3-kinase,p-PI3 K)及磷酸化 mTOR(phosphorylated mTOR,p-mTOR)蛋白的相对表达量.结果 与对照组比较,千金藤素 3 组细胞的增殖活性降低,细胞凋亡率升高,且比较细胞增殖活性,高剂量组＜中剂量组＜低剂量组,比较细胞凋亡率,低剂量组＜中剂量组＜高剂量组(P＜0.05);AO 染色结果显示,与对照组比较,千金藤素 3 组亮红色荧光比例升高,自噬溶酶体的数量增多,自噬程度增强,且低剂量组＜中剂量组＜高剂量组;与对照组比较,千金藤素 3 组 LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin1 mRNA的表达水平升高,p62 mRNA 的表达水平及 p-PDK1/PDK1、p-Akt/Akt、p-PI3 K/PI3 K 和 p-mTOR/mTOR 蛋白的相对表达量降低,且比较 LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin1 mRNA表达量,低剂量组＜中剂量组＜高剂量组,比较p62 mRNA表达及p-PDK1/PDK1、p-Akt/Akt、p-PI3 K/PI3 K和 p-mTOR/mTOR蛋白的相对表达量,高剂量组＜中剂量组＜低剂量组(P＜0.05).结论 千金藤素可诱导宫颈癌细胞自噬,降低细胞的增殖能力,促进细胞凋亡,其作用机制可能与抑制 PDK1 介导的 Akt/mTOR 信号通路有关.

关键词：千金藤素、宫颈癌、细胞自噬、蛋白激酶B、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白

所属期刊栏目：38

分类号：R965(药理学)

资助基金：河北省医学科学研究课题计划项目20210990

在线出版日期：2023-08-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：53-58