lncRNA-HOTAIR通过靶向负调控miR-1-3p抑制脂多糖诱导的H9c2大鼠心肌细胞增殖并促进炎症反应
目的 探讨长链非编码RNA-HOX转录本反义基因间RNA(lncRNA-HOTAIR)是否通过靶向微小RNA miR-1-3p调控脓毒症的炎症反应.方法 利用0.5 μg/mL脂多糖(LPS)诱导H9c2大鼠心肌细胞,建立脓毒症心肌细胞损伤模型,将H9c2细胞分为对照组、LPS组、LPS联合HOTAIR小干扰RNA阴性对照(si-NC)组、LPS联合HOTAIR小干扰RNA(si-HOTAIR)组、LPS 联合 miR-1-3p 阴性对照(miR-NC)组、LPS 联合 miR-1-3p 组、LPS 联合 si-HOTAIR 和 miR-1-3p 拮抗剂阴性(anti-miR-NC)组、LPS联合siHOTAIR和anti-miR-1-3p组.实时定量PCR检测HOTAIR和miR-1-3p表达,CCK-8法检测细胞增殖,Western blot法分析KI-67抗原(ki67)、P21、B细胞淋巴瘤因子2(Bc]2)、Bc12相关X蛋白(BAX)的蛋白表达,流式细胞术评估细胞凋亡,ELISA测定炎性因子白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平.双荧光素酶报告实验分析HOTAIR和miR-1-3p的靶向关系.结果 LPS组H9c2细胞中HOTAIR表达量高于对照组,miR-1-3p表达量低于对照组.与LPS联合si-NC组比较,LPS联合si-HOTAIR组LPS处理H9c2细胞增殖活性、ki67、Bcl2表达量增多,P21表达量、凋亡率、BAX表达量、IL-6和TNF-α水平降低.HOTAIR靶向调控miR-1-3p的表达.LPS联合miR-1-3p组较LPS联合miR-NC组的H9c2细胞增殖活性、ki67、Bc12表达量升高,P21表达量、凋亡率、BAX表达量、IL-6、TNF-α水平降低.与LPS联合si-HOTAIR和anti-miR-NC组比较,LPS联合si-HOTAIR和anti-miR-1-3p组H9c2细胞增殖活性降低、ki67、Bcl2表达减少,P21、BAX表达,细胞凋亡、IL-6、TNF-α水平增加.结论 HOTAIR通过靶向负调控miR-1-3p的表达,抑制LPS诱导的H9c2心肌细胞增殖,并诱导细胞凋亡和炎症反应.
脓毒症、HOX转录本反义基因间RNA(HOTAIR)、miR-1-3p、H9c2细胞、细胞凋亡、炎症反应
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R364.5;Q255;R392.12(病理学)
广东省医学科研基金B2018056
2022-11-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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