兔抗人谷氨酰胺果糖6磷酸氨基转移酶1(GFPT1)多克隆抗体的制备及应用

摘要：

目的 制备特异性识别人谷氨酰胺果糖6磷酸氨基转移酶1(GFPT1)的兔多克隆抗体.方法 通过比对GFPT1及其高度同源的同工酶GFPT2的蛋白质序列,针对GFPT1的特异性序列设计并合成2个多肽,多肽与钥孔戚血蓝蛋白(KLH)偶联作为抗原免疫新西兰大白兔,3次加强免疫后得到抗血清,采用ELISA检测抗血清效价.构建GFPT1和GFPT2的大肠杆菌表达载体,诱导表达获得GFPT1和GFPT2重组蛋白,通过Western blot法检测GFPT1和GFPT2重组蛋白以验证抗血清的特异性、免疫荧光细胞化学染色检测786-O细胞GFPT1的表达验证获得的抗血清能否识别内源性表达的GFPT1.结果 获得了特异性识别GFPT1的多克隆抗体,效价高达1:1 458 000,该抗体可用于Western blot法以及免疫荧光细胞化学染色.结论 成功制备了特异性识别GFPT1的兔多克隆抗体.

关键词：谷氨酰胺果糖6磷酸氨基转移酶1(GFPT1)、重组蛋白、多克隆抗体

所属期刊栏目：38

分类号：Q512+7;S852.4+3;R392-33(蛋白质)

资助基金：国家自然科学基金;中央高校基本科研业务费

在线出版日期：2022-11-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：651-656