新风胶囊通过抑制成纤维细胞样滑膜细胞的长链非编码RNA和NF-κB表达减轻类风湿关节炎的炎症反应
目的 研究长链非编码 RNA ENST00000619282(lncRNA ENST00000619282)、miR-148b-5p、核因子 κB(NF-κB)在肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞(RA-FLS)中的表达,以及新风胶囊(XFC)的干预作用.方法 收集正常人和XFC治疗前后RA患者外周血单个核细胞(PBMC)各30例,观察ENST00000619282的表达、与临床指标的相关性分析及XFC的治疗作用;建立RA-FLS永生化细胞系,制备XFC含药血清,观察XFC含药血清对RA-FLS ENST00000619282、miR-148b-5p及NF-κB通路表达的影响.结果 与正常组相比,RA患者ENST00000619282表达显著升高,受试者工作特征(ROC)曲线结果显示ROC曲线下面积(AUC)为0.7166,Spearman相关性分析结果表明,ENST00000619282与病程、IgA呈负相关,与28关节疾病活动度评分(DAS28)、视觉模拟评分(VAS)、血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)呈正相关;XFC治疗后,ENST00000619282表达显著下降.CCK-8法结果显示,TNF-α对RA-FLS最佳处理剂量和时间分别为10 ng/mL和48 h,XFC对RA-FLS的最佳干预浓度和时间分别为648 mg/100 g XFC和72 h.实时定量PCR结果显示,与RA-FLS组相比,TNF-α处理的RA-FLS组ENST00000619282、B细胞κ多肽基因增强子抑制蛋白激酶γ(IKBKG)、核因子κB抑制蛋白激酶α(IKKα)、IKKβ、核因子κB抑制蛋白α(IKBα)、NF-κB p65的表达显著升高,miR-148b-5p的表达显著降低;经XFC处理后,ENST00000619282、IKBKG、IKKα、IKKβ、IκBα、NF-κB p65的表达显著降低,miR-148b-5p的表达显著升高.免疫荧光结果显示,与RA-FLS相比,TNF-α处理的RA-FLS组IKBKG蛋白的表达显著升高;经XFC处理后,IKBKG蛋白的表达显著降低.结论 ENST00000619282在RA-PBMC和RA-FLS中表达均升高,XFC通过下调ENST00000619282和NF-κB的表达、上调miR-148b-5p的表达,抑制RA炎症免疫反应和细胞凋亡.
新风胶囊(XFC)、成纤维细胞样滑膜细胞(FLS)、外周血单个核细胞(PBMC)、ENST00000619282、核因子κB(NF-κB)
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R593.22;R364.5(全身性疾病)
国家重点研发计划;国家自然科学基金;安徽省高校协同创新项目;安徽省名中医刘健工作室建设项目;安徽省重点研究与开发计划项目;安徽现代中医内科应用基础与开发研究省级实验室;安徽省115创新团队皖人才办号;新安医学教育部重点实验室项目
2022-11-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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