小鼠可溶性信号调节蛋白α(SIRPα)胞外段蛋白增强巨噬细胞对L1210白血病细胞的吞噬能力

摘要：

目的 克隆小鼠信号调节蛋白α(SIRPα)胞外段基因(mSIRPα)并构建其原核表达载体,实现蛋白的可溶性表达后,研究mSIRPαext在肿瘤免疫调节中的作用.方法 利用小鼠淋巴结来源的cDNA扩增mSIRPαext基因,并进一步构建pET32a-SIRPαext原核表达载体.在实现含有硫氧还蛋白(Trx)标签的重组Trx-mSIRPα ext融合蛋白可溶性表达后,培养小鼠骨髓来源单核细胞并诱导其向巨噬细胞分化,接着将巨噬细胞与羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)标记的L1210白血病细胞共培养,在共培养体系中添加Trx-mSIRPαext蛋白及Trx对照蛋白,通过免疫荧光细胞化学染色和共聚焦显微镜观察重组蛋白在巨噬细胞吞噬肿瘤细胞中的作用.结果 获得纯化的可溶性Trx-mSIRPαext蛋白,利用体外吞噬实验证明该蛋白可增强巨噬细胞对小鼠L1210白血病细胞的吞噬作用.结论 原核表达的Trx-mSIRPαext蛋白可有效提高巨噬细胞对白血病细胞的吞噬作用,从而发挥抗肿瘤免疫治疗效果.

关键词：信号调节蛋白α(SIRPα)、CD47、原核表达、吞噬作用、巨噬细胞

所属期刊栏目：34

分类号：R392-33;R392.1;Q279;R733.7;Q24

资助基金：陕西省自然科学基础研究项目2018JM7064;唐都医院创新发展基金2016JCYJ010

在线出版日期：2019-04-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1057-1062