敲低组蛋白去乙酰化酶SIRT1抑制自噬并增强A549细胞对顺铂的敏感性

摘要：

目的 通过敲低肺癌A549细胞中组蛋白去乙酰化酶转录沉默信息调节因子1(sirtuin 1/SIRT1)的表达抑制顺铂(DDP)诱导的自噬,增强A549细胞对DDP的敏感性.方法 通过实时定量PCR和Western blot法分别检测人肺上皮BEAS-2B细胞、肺癌A549细胞和A549/DDP细胞中SIRT1的mRNA和蛋白水平.Western blot法检测DDP处理的A549细胞中SIRT1及自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)、P62、beclin-1的蛋白水平.利用小干扰RNA (siRNA)技术下调肺癌A549细胞的SIRT1水平,经Hoechst33258染色结合流式细胞术检测A549细胞的凋亡变化,Western blot法检测A549细胞中SIRT1、LC3、P62、裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)和多腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)的蛋白水平.结果 SIRT1在肺癌A549细胞和A549/DDP细胞的mRNA和蛋白水平明显高于人肺上皮BEAS-2B细胞,且A549/DDP细胞中SIRT1的mRNA和蛋白水平显著高于A549细胞.经DDP处理后的A549细胞中的SIRT1、LC3和beclin-1水平增高,P62水平降低.siRNA技术下调A549细胞中SIRT1表达后,经DDP诱导,细胞核固缩和核碎裂增多,细胞凋亡率明显增加,P62、c-caspase-3和PARP蛋白水平升高,LC3蛋白水平降低.结论 SIRT1在肺癌A549细胞中高表达,下调SIRT1的表达水平可抑制DDP诱导的A.549细胞自噬活性,提高A549细胞对DDP的敏感性.

关键词：肺癌、顺铂、自噬、凋亡、SIRT1

所属期刊栏目：33

分类号：Q279;R392-33;R734.2;Q255(细胞生物物理学)

在线出版日期：2018-05-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1669-1675