敲低维甲酸诱导基因Ⅰ(RIG-I)抑制全反式维甲酸诱导的NB4急性早幼粒白血病细胞的分化
目的 探讨慢病毒介导的短发夹RNA(shRNA)敲低NB4急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞维甲酸诱导基因Ⅰ(RIG-I)对全反式维甲酸(ATRA)诱导NB4细胞分化的影响及其机制.方法 将含有人RIG-I基因shRNA序列(RIG-I-shRNA)及含绿色荧光蛋白(GFP)基因的慢病毒感染NB4细胞,实时定量PCR (qRT-PCR)及Western blot法分别检测ATRA诱导前后NB4细胞RIG-I mRNA和蛋白水平;流式细胞术观察慢病毒感染效率和RIG-I-shRNA对ATRA诱导NB4细胞分化的影响;Western blot法检测敲低RIG-I水平后,ATRA处理对蛋白激酶B308位苏氨酸(AKT-Thr308)磷酸化的调控效应.结果 含RIG-I-shRNA序列的慢病毒可成功感染NB4细胞,下调ATRA诱导的RIG-I水平;敲低RIG-I后,明显抑制ATRA诱导NB4细胞分化,同时上调AKT-Thr308磷酸化水平.结论 敲低NB4细胞RIG-I蛋白可上调AKT-Thr308磷酸化水平抑制ATRA诱导的急性早幼粒白血病细胞分化.
维甲酸诱导基因Ⅰ(RIG-I)、慢病毒、RNA干扰技术(RNAi)、细胞分化、蛋白激酶B(AKT)
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R733.71;Q279;Q254;R292-3(肿瘤学)
天津市科委基金13JCYBJC21200
2017-08-07(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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