中和抗体阻断FcγRⅠ降低脂多糖诱导的大鼠PC12细胞凋亡

摘要：

目的 探讨IgG Fc受体Ⅰ(FcγR Ⅰ)在脂多糖(LPS)诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞凋亡中的作用.方法 将PC12细胞接种于培养板中,用(50、125、250、500、1000) μg/mL LPS处理24h,噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活率,选取合适的LPS剂量.待细胞处于对数生长期,采用随机数字表法分为空白对照组:不进行任何处理,继续培养24h;LPS组:培养液中加入500 μg/mL LPS,孵育24h;LPS联合FcγR Ⅰ中和抗体组:培养液中加入500μg/mL LPS和0.2 μg/mL FcγR Ⅰ中和抗体,孵育24h.处理结束后,实时荧光定量PCR和Western blot法检测各组FcγR Ⅰ mRNA和蛋白含量,异硫氰酸荧光素标记的膜联素V/碘化丙啶(annexin V-FTTC/PI)染色结合流式细胞术检测细胞凋亡,采用免疫组织化学染色法检测各组细胞caspase-3、Bcl-2和BAX的蛋白水平.结果 随着LPS剂量的增加,PC12细胞的活力逐渐下降;与对照组相比,LPS处理组FcγR Ⅰ mRNA和蛋白水平增加,caspase-3、Bcl-2和BAX蛋白水平增加,细胞凋亡率增加;与LPS组相比,LPS联合FcγR Ⅰ中和抗体组FcγR Ⅰ mRNA和蛋白水平降低,caspase-3、BAX蛋白水平显著降低,细胞凋亡率降低,Bcl-2蛋白水平增加.结论 FcγR Ⅰ参与LPS诱导的PC12细胞凋亡.

关键词：IgG Fc受体Ⅰ(FcγRⅠ)、脂多糖、PC12细胞、细胞凋亡

所属期刊栏目：33

分类号：R392-33;Q279;Q55

资助基金：国家自然科学基金81300969;山东省自然科学基金ZR2012HL27;潍坊市科技局课题20121373

在线出版日期：2017-08-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：746-750