黄芩素通过抑制胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)促进HeLa细胞凋亡
目的 探讨黄芩素和U0126对人宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响及机制.方法 HeLa细胞先用(1、2、5、10、20、50、100、200、300) μmol/L黄芩素,(1、2、5、10、20、30) μmol/L U0126处理24h后,CCK-8法筛选最佳的处理浓度.而后分别用200 μmol/L黄芩素、10 μmol/L U0126、200 μmol/L黄芩素联合10 μmol/L U0126处理HeLa细胞24h,流式细胞术检测细胞周期、细胞凋亡,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)法检测细胞凋亡指数;实时定量PCR检测HeLa细胞胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、Bax和Bc0-2的mRNA水平、Western blot法检测ERK1/2、Bax和Bcl-2蛋白水平.结果 HeLa细胞经不同浓度的黄芩素或经不同浓度的U0126处理后,CCK-8法证明黄芩素最佳抑制浓度为200 μmol/L,U0126最佳抑制浓度为10 μmol/L;HeLa细胞经200 μmol/L黄芩素处理24h后,G0/G1期细胞比例明显增多,S期细胞比例明显下降,采用200 μmol/L黄芩素联合10 μmol/L U0126处理HeLa细胞24h,S期细胞比例显著降低;10 μmol/L U0126和200 μmol/L黄芩素单独处理HeLa细胞,引起明显细胞凋亡,二者联合处理凋亡更明显;HeLa细胞经200 μmol/L黄芩素或10 μmol/L U0126单独处理或联合处理24h后,ERK1/2和Bcl-2的mRNA表达水平明显降低、而Bax的mRNA水平升高;蛋白水平上,ERK1/2的磷酸化水平明显降低,Bax蛋白水平增加,Bcl-2的蛋白水平降低.结论 黄芩素和U0126均可抑制HeLa细胞增殖、诱导细胞凋亡,增加G0/G1期细胞比例,降低S期细胞比例,联合应用效果更明显.
黄芩素、U0126、宫颈癌、HeLa细胞、凋亡、胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)
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R392-33;Q279;R285.5;Q255
四川省科技厅项目14JC01353-LH67;四川省泸州市科技局项目2014-S-35;四川省泸州市科技局市校联合项目2015LZCYD-S02
2017-03-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1507-1512