香烟烟雾提取物下调小鼠C2C12成肌细胞组蛋白去乙酰化酶2表达并增强炎性细胞因子释放
目的 观察香烟烟雾暴露后,小鼠C2C12成肌细胞内炎症介质、组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)和核因子κB(NF-κB)的变化.方法 培养小鼠C2C12成肌细胞,用香烟烟雾提取物(CSE)进行处理.采用MTT法观察CSE对细胞生长的影响,以确定作用于细胞的合适浓度.将培养6~7d的C2C12细胞接种到6孔板,分为对照组和(6.25、12.50、25.0) mL/L CSE组,培养24h.ELISA测定各组细胞上清液白细胞介素8(IL-8)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量;实时定量PCR (qRT-PCR)检测各组细胞HDAC2 mRNA的表达;Western blot法检测各组细胞中HDAC2的蛋白相对表达量;免疫共沉淀技术检测细胞内HDAC2/NF-κB复合物.结果 MTT结果提示终浓度为50 mL/L的CSE抑制C2C12细胞的生长;CSE刺激24h后,C2C12细胞IL-8和TNF-α释放增加,HDAC2的mRNA及蛋白相对表达量减少,并在一定程度上具有浓度依赖性;免疫共沉淀技术证实存在HDAC2/NF-κB复合物.结论 CSE下调C2C12细胞HDAC2表达,引起炎症因子释放增加.
香烟烟雾提取物、C2C12成肌细胞、组蛋白去乙酰化酶2、核因子κB、炎症
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R364.5;R392-33;F768.29;R563(病理学)
国家自然科学基金81260012
2015-04-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
312-315,320