用shRNA下调泛素表达抑制人肺癌H1299细胞生长并促进其凋亡

摘要：

目的 通过下调人肺癌细胞中泛素(Ub)基因的表达,研究其对肺癌细胞生长的影响及其作用机制.方法 设计沉默泛素基因表达的shRNA-UBB、shRNA-UBC质粒,用反转录PCR及Western blot法验证shRNA的沉默效果;研究泛素低表达后H1299细胞的生长和克隆形成能力的变化;采用annexin V-PE及DNA片段法检测细胞凋亡变化;PI染色结合流式细胞术检测细胞周期的变化.结果 敲减泛素基因(Ub-KD)48、72 h后,能明显抑制H1299细胞的增殖、降低细胞的克隆形成率;与对照组相比,Ub-KD (shRNA-UBB/UBC)组细胞凋亡率显著增加(shRNA-NC:5.60％,shRNA-UBB:9.07％,shRNA-UBC:11.70％,shRNA-UBB/UBC:17.82％).联合shRNA-UBB、shRNA-UBC作用下能显著增加H1299细胞G1期比例(shRNA-NC:34.53％,shRNA-UBB:34.40％,shRNA-UBC:42.77％,shRNA-UBB/UBC:50.20％).结论 联合敲减UBB、UBC基因通过增加细胞凋亡及细胞G1期阻滞抑制肺癌细胞的生长及克隆形成能力.

关键词：泛素、肺癌、细胞生长、细胞凋亡、细胞周期阻滞

所属期刊栏目：30

分类号：R34(人体生物化学、分子生物学)

资助基金：国家自然科学基金81172597,81102078;江苏省高校重大科研项目11KJA310001

在线出版日期：2014-12-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1287-1290