生殖支原体脂质相关膜蛋白诱导宫颈上皮细胞表达人β防御素2
目的 观察生殖支原体脂质相关膜蛋白(LAMP)能否诱导宫颈上皮细胞表达人β防御素2(hBD-2),并探讨其可能的调控机制.方法 体外培养End1/E6E7人宫颈上皮细胞,用不同浓度的LAMP作用细胞48 h,反转录PCR检测hBD-2 mRNA的表达,Western blot法检测hBD-2蛋白的表达;用Toll样受体2(TLR2)和TLR6中和抗体孵育End1/E6E7细胞,并用TLR2、TLR6和MyD88负显性突变体转染细胞,以明确ⅡR2、TLR6和MyD88在介导hBD-2表达中的作用;Western blot法检测核因子κB(NF-κB) p65亚基核转位情况,电泳迁移率实验(EMSA)分析LAMP处理前后NF-κB的DNA结合活性;采用NF-κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)处理,观察对hBD-2表达的影响.结果 生殖支原体LAMP可诱导End1/E6E7细胞表达hBD-2mRNA和蛋白.TLR2和TLR6中和抗体以及其负显性突变体转染后,能降低hBD-2表达;MyD88负显性突变体也能显著抑制LAMP诱导的hBD-2表达.Western blot结果显示,LAMP处理后可诱导p65核转位,并能增强NF-κB的DNA结合活性.而NF-κB抑制剂PDTC处理后,hBD-2表达降低.结论 生殖支原体LAMP可诱导End1/E6E7细胞表达hBD-2,可能受TLR2、TLR6/MyD88/NF-κB调控.
生殖支原体、脂质相关膜蛋白、β-防御素2、宫颈上皮细胞
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R518.9;R392-33;R711.32(传染病)
国家自然科学基金31000091,81072418;特殊病原体防控湖南省重点实验室资助项目湘科计字[2014]5号,湘教通[2012]312号;湖南省科研条件创新专项2013TT2013
2014-12-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1266-1270